作者：田军彪 单兆伟 刘建平 赵红伟 康薇
【摘要】 目的 探讨芪仙安肠方对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导溃疡性结肠炎模型大鼠的疗效及作用机制。方法 采用TNBS诱导制备溃疡性结肠炎大鼠模型40只,随机分为模型组、阳性对照组及芪仙安肠方低、中、高剂量组，各8只,并选未造模大鼠8只作为正常对照组。各组均灌胃给药,模型组和正常对照组予0.9%氯化钠注射液，阳性对照组予柳氮磺吡啶（SASP）0.50 g/kg，芪仙安肠方低、中、高剂量组分别给予相应剂量(5.0、10.0、20.0 g/kg) 的芪仙安肠方原液，均每日1次。给药时间从造模后第3日开始,连续14日。造模后第18日观察各组大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)及黏膜病理组织学情况,并检测免疫球蛋白（Ig）A、IgG、补体3（C3）、补体4（C4）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)及白细胞介素-4(IL-4)含量变化。结果 芪仙安肠方低、中、高剂量组结肠黏膜病理损伤明显改善，CMDI均降低,C3、C4及IL-4含量明显提高，IgA、IgG、TNF-α、IL-2含量降低，与模型组比较差异均有统计学意义（P<0.01）；芪仙安肠方中、高剂量组治疗后CMDI、C3、C4、IL-2、IL-4、TNF-α含量与正常对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05）,与阳性对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论 芪仙安肠方对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎疗效确切，中、高剂量尤其显著,其作用机制可能与免疫调节和减轻细胞因子损伤有关。
【关键词】 结肠炎 溃疡性 中药疗法 免疫球蛋白A 免疫球蛋白G 补体3 补体4 肿瘤坏死因子α 动物实验
A study on the therapeutic effect and mechanism of Qixiananchang decoction on ulcerative colitis of rats
【Abstract】 Objective To observe the therapeutic effect and mechanism of Qixiananchang decoction on ulcerative colitis of rats induced by trinitrobenzene sulphoacid (TNBS). Methods 40 SD rats were induced by TNBS and modeled and divided into 5 groups: model group, positive control group, high-dose, mid-dose, low-dose Qixiananchang decoction groups, with 8 rats in each group. There were also 8 non-modeled SD rats in normal control group. All groups were clystered: positive control group was treated by Salazosulfapyridine (SASP) 0.5 g/kg, high-dose, mid-dose and low dose groups were given Qixiananchang decoction respectively (5.0 g/kg,10.0 g/kg, 20.0 g/kg) from the 3rd day after modeling for 14 days and recorded the changes of the following values: CMDI, mucous membrane histopathology, IgA,IgG,C3,C4,-α(TNF-α),IL-2,IL-4 after 18 days. Results The therapeutic effects in all Qixiananchang decoction groups were superior to those in model control group (P<0.01). There was no significant differences between mid/high dose groups and normal control group (P>0.01),and there was a significant difference between mid/high dose groups and positive control group (P<0.01). Conclusion Qixiananchang decoction is effective in treatment on ulcerative colitis of rats induced by trinitrobenzene sulphoacid, especially in mid-dose and high-dose groups. Its mechanism may have a close connection with immunoregulation and alleviation of cytokine damages.
【Key words】 Qixiananchang decoction; Ulcerative colitis; TNBS; Immunoglobulin; Complement; Cytokine
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种临床常见的反复发作性、难治性消化系统疾病。芪仙安肠方具有健脾益气、清热燥湿、化瘀解毒的功效。现以三硝基苯磺酸（TNBS）为半抗原诱导建立大鼠UC模型,观察芪仙安肠方对其治疗作用并探讨相关机制。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 芪仙安肠方（药物组成：黄芪12 g，炒白术10 g，仙鹤草15 g，败酱草12 g，黄连3 g，白及12 g，炒白芍药15 g，煨木香6 g，血竭2 g）原液(由河北省中医院制剂室提供,每mL含生药2.0 g)，芪仙安肠方低、中、高剂量(5.0、10.0、20.0 g/kg)分别相当于临床成人日用量的3.5、7、14倍。柳氮磺吡啶(SASP)（上海三维制药有限公司,批号: 200609C15）；三硝基苯磺酸（TNBS）（日本TCI公司，批号：P1315）;ELISA试剂盒为RD公司产品；免疫球蛋白试剂盒由四川迈克科技有限责任公司提供。
1.2 实验动物 SD大鼠48只，雄性，体质量180～200 g,由河北医科大学实验动物中心提供。动物等级: 清洁级。合格证号:612168。
1.3 仪器 日本奥林帕斯显微镜（型号BX51T-PHD-J11）；莱卡RM 2135切片机（德国LEICA） ；LG15-W高速微量离心机（北京医用离心机厂）；BM-Ⅱ型病理组织包埋机（安徽电子科学研究所）；Biocell 2010酶标检测仪（奥地利Anthos Labtec Instruments公司）。
1.4 造模方法 实验前禁食24 h，自由饮水，在乙醚麻醉下,用直径2 mm的硅胶软管经肛门轻插至结肠8 cm处,推入含TNBS 20 mg的30%乙醇溶液0.5 mL，捏紧肛门平放10 min即可。3日后即为造模成功［1，2］。
1.5 动物分组及给药方法 将造模大鼠随机分为5组，各8只。各组均于造模后第3日灌胃给药，模型组予0.9%氯化钠注射液;芪仙安肠方低、中、高剂量组分别予相应剂量(5.0、10.0、20.0 g/kg)；阳性药对照组予SASP 0.50 g/kg。另取8只未造模大鼠作为正常对照组,予0.9%氯化钠注射液。均每日1次,共14日。
1.6 观察指标及检测方法 造模后第18日,各组大鼠均予2%戊巴比妥麻醉, 腹主动脉取血做生化检查。用免疫比浊法检测血清免疫球蛋白（Ig）A、IgG、补体3（C3）、补体4（C4）。ELISA法检测血清瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)的变化。取出全结肠,纵向剪开,冲洗掉污物,测量结肠长度及最大宽度,肉眼观察结肠的损伤情况。黏膜损伤指数（CMDI）评分标准［3］:粘连，0分:无;1分:轻度(结肠与其它组织剥离较易);2分:重度。溃疡形成及炎症，0分:无; 1分:局部充血,无溃疡; 2分: 1处溃疡不伴充血或肠壁增厚;3分:1处溃疡伴炎症;4分:≥2处溃疡伴炎症;5分:≥2处溃疡和(或)炎症>1 cm; 6～8分:溃疡和(或)炎症＞2 cm,病变范围每增加1 cm,计分加1分。在病变最严重处剪取一块结肠,甲醛固定,石蜡包埋,HE染色,光镜下观察病理组织学变化。其余结肠称其质量,与剪取的结肠之和为结肠质量。
1.7 统计学处理方法 各组检测结果用均数±标准差（x±s）表示,组间比较采用t检验。用SPSS 11.5软件进行统计学处理。
2 结果
2.1 对大鼠一般状态的影响 正常组大鼠反应灵活，毛色光润，喜活动，主动觅食，大便呈小球状。其余5组大鼠造模后第2日开始精神萎靡，懒于活动，被毛松散无泽，拱背，食量下降，拉稀便或黏液血便，形态消瘦，体质量下降，粪隐血试验呈强阳性。芪仙安肠方低、中、高剂量组及阳性对照组治疗5～7日后,稀便基本消失,状态恢复接近正常,但体质量仍明显减轻；粪隐血试验虽呈阳性,但程度明显减轻;腹泻、黏液便等症状也有所改善，渐为软便；食量渐增，活动明显增多，精神状态好转。其中芪仙安肠方高、中剂量组疗效最佳。
2.2 对大鼠组织病理形态学的影响
2.2.1 肉眼观察 正常对照组大鼠结肠黏膜光滑,纹理清晰,未见充血、水肿。模型组肠管变狭小，肠壁增厚，黏膜可见多个溃疡，溃疡旁黏膜充血、水肿明显。芪仙安肠方低、中、高剂量组及阳性对照组损伤明显减轻，尤以芪仙安肠方高、中剂量组明显，高剂量组结肠溃疡面积显著缩小,水肿消失,肠腔未见粘连。
芪仙安肠方对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及机制由800论文网收集整理，转载请注明出处！
